无菌室一般是在微生物实验室内专辟的一个小房间，面积不宜过大，约4m2~5m2，高2.5m左右即可。无菌室外要设一个缓冲间、净化风淋间及更衣间。无菌室和缓冲间都须密闭。室内装备须有空气过滤装置。无菌室和缓冲间都装有紫外线灯，无菌室的紫外线灯距离工作台面1m。无菌室内的地面、墙壁须平整，不易藏污垢，便于清洁。工作台的台面须处于水平状态。工作人员进入无菌室应在更衣室穿戴好灭菌的衣、帽、鞋，经过净化风淋室，再到缓冲间，然后进入无菌室进行检验工作。县级市的企业一般实验室多使用小型超净工作台。超净工作台其结构简单，便于移动，工作台内有紫外灯和净化风机，外部是推拉式小门或开两个洞的玻璃门，操作时将双臂伸进去即可。对于无菌室一般有如下的要求：

(1)无菌操作间的洁净度应达到10000级，室内温度保持在20℃~24℃，湿度保持在45%~60%，超净台洁净度应达到100级。无菌室应每月检查菌落数，在无菌室或超净工作台开启的状态下，取内径90mm的无菌培养皿若干，无菌操作分别注入融化并冷却至约45℃的平板计数琼脂培养基的15mL，放至凝固后，倒置于36℃±1℃培养箱培养48h，证明无菌后，取平板3~5个，分别放置在工作位置的左中右等处，开盖暴露30分钟后，倒置于36℃±1℃培养箱培养48h，取出检查。100级洁净区平板杂菌数平均不得超过1个菌落，10000级的洁净室平均不得超过3个菌落，如超过限度，应对无菌室进行彻底消毒，直至重复检查合乎要求为止。

(2)无菌室应保持清洁整齐，室内仅存放须的检验用具如酒精灯、酒精棉、打火机、镊子、接种环、剪刀及玻璃笔等。严禁堆放杂物，以防污染。

(3)无菌室应备有工作浓度的消毒液，如5%的甲酚溶液，75%的酒精，0.1%的新洁尔灭溶液等等。

(4)需要带入无菌室使用的仪器、药品、玻璃器皿等一切物品，均应包扎严密或应经适宜的方法灭菌。如培养皿、吸管用不锈钢筒装好在160℃~170℃的干燥箱中灭菌1h~2h；生理盐水用高压灭菌器于121℃灭菌20分钟等。

(5)无菌室使用前须打开无菌室和缓冲间的紫外灯辐照30分钟以上，并且同时打开净化风机进行换气。在紫外灯关闭后半小时方可进入无菌室进行工作。在样品检验完毕后，应及时清理剩余样品和各种药品及玻璃器皿，安全退出后再打开所有紫外灯辐照灭菌30分钟。

(6)送检样品在检验前应保持外包装完整，不得开启，以防污染。检验前，用75%的酒精棉球消毒外表面，必要时用点燃的酒精棉进行灭菌。

(7)每次操作过程中，均应做空白对照，以检查无菌操作的可靠性。

(8)吸取菌液时，须用吸耳球吸取，切勿直接用口接触吸管，如吸管碰到手及其它未灭菌的物体，须重新更换，以防污染。

(9)接种针每次使用前后，须通过火焰燃烧灭菌，待冷却后，方可接种培养物。

(10)带有菌液的吸管、试管等器皿应浸泡在盛有5%的来苏儿溶液的消毒桶内消毒，24h取出冲洗；培养皿则需在高压灭菌器中重新灭菌后方可处理营养基，切记不要直接冲入下水道中，防止阻塞。如有菌液洒在桌上或地上，应立即用5%石碳酸溶液或3%的来苏儿倾覆在被污染处至少30min，再做处理，工作衣帽等受到菌液污染时，应立即脱去，高压蒸汽灭菌后洗涤。

无菌室装修

无菌室装修一般包括洁净室地面、墙板、吊顶、及配套的空调、照明、消防、给排水等与洁净室相关的内容，根据要求，洁净厂房的建筑围护结构和室内装修，应选用气密性良好，且在温度和湿度变化时变形小的材料。洁净室内墙壁和顶棚的装修应符合下列要求：

(1)无菌室内墙壁和顶棚的表面应平整、光滑、不起尘、避免眩光、便于除尘，并应减少凹凸面。

(2)无菌室不宜采用砌筑墙抹灰墙面，当采用时宜干燥作业，抹灰应采用高级抹灰标准。墙面抹灰后应刷涂料面层，并应选用难燃、不开裂、耐清洗、表面光滑、不易吸水变质发霉的涂料。这样一般情况下洁净室装修主要选择比较好的彩涂金属壁板作为内装修材料。但是对于高大空间厂房来说，因层高比较高，对金属壁板隔墙的安装比较困难，强度差，造价高，不能承重等问题。本工程分析了高大厂房洁净室产尘的特点及房间洁净度的要求，没有采用常规的金属壁板的内装修做法，在原有土建墙体上打磨进行环氧涂层，整个空间不设吊顶，增加使用空间。

无菌室气流组织

对于高大洁净厂房，采用洁净分层空调系统可以使系统的总送风量大为减少。风量减少了，要得到较好的洁净空调效果，采用合理的气流组织就显得尤为重要，既要保证送风和回风系统的均匀性，减少洁净工作区的涡流和气流回旋，又要增强送风气流的扩散特性，充分发挥送风气流的稀释作用。在万级或十万级洁净度要求的高大洁净厂房中，可以引用舒适性空调高大空间的设计理念，如机场、展馆等大空间使用喷口的方式。采用喷口，侧面送风，气流可以扩散较长的距离，喷口送风是依靠喷口吹出的高速射流实现送风的方式，主要实用于高大厂房或者层高很高的公共建筑空间的空气调节场所。喷口采用侧送风，将喷口与回风口布置在同一侧，空气以较高的速度、较大的风量集中由设置在空间上的若干个喷口射出，射流行至一定路程后折回，使整个空调区处于回流区，然后有设在下部的回风口抽走返回空调机组。其特点是，送风速度高、射程远。射流带动室内空气进行强烈混合，速度逐渐衰减，并在室内形成大的回旋气流，从而使空调区获得较均匀的温度场和速度场。